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        主頁 &amp;gt; 技術服務 &amp;gt; m6A整體水平定量

        m6A整體水平定量

        m6A整體水平定量

        技術簡介:

        N6-甲基腺嘌呤(m6A)是真核生物RNA分子中最常見及豐度最高的修飾方式,m6A占所有RNA堿基修飾的比例超過80%,而且在不同的物種中存在。m6A主要分布在mRNA中,同時也存在于非編碼RNA中。mRNA轉錄本中的m6A相對豐度已經被證實能夠影響RNA代謝過程,如剪切、出核轉運、翻譯能力和穩定性、RNA轉錄等。異常的m6A甲基化水平受到m6A RNA甲基化酶和去甲基化酶的影響,從而導致RNA的異常功能及疾病的發生。因此,RNA中動態可逆的m6A化學修飾能夠作為新的表觀遺傳學標志物,具有重要的生物學作用。認識RNA轉錄本中m6A甲基化水平和分布能夠有利于疾病的診斷和治療。
            本檢測采用EpiQuik m6A RNA甲基化定量檢測試劑盒,通過比色的方法定量總RNA中m6A 的甲基化程度,適用于哺乳動物、植物、真菌、細菌和病毒等物種。檢測原理是在特定的結合緩沖液中,將待檢測的total RNA或者標準品結合到微孔板表面,然后依次加入特異性的m6A捕獲抗體、檢測抗體和顯色試劑,最終顯示的顏色深淺與樣品中m6A的濃度呈正比,利用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線即可計算樣品中m6A的絕對含量,同時通過total RNA總量校正可對不同樣本中m6A含量進行比較。


        技術參數及分析內容


        技術優勢


           • 采用商品化試劑盒進行測定,穩定性高,重復性好
           • 采用ELISA方法進行檢測,檢測靈敏度高,可檢測低至10pg m6A
           • 抗體特異性好,檢測結果不受非甲基化堿基的影響
           • 結合緩沖液保證RNA的高效結合,可檢測長度>70nt的mRNA和ncRNA
           • 適用范圍廣,可檢測哺乳動物、植物、真菌、細菌等物種來源的樣本

        技術參數及分析內容


        技術路線



        產品應用文獻

        1. Slobodin B et. al. (April 2017). Transcription Impacts the Efficiency of mRNA Translation via Co-transcriptional N6-adenosine Methylation. Cell. 169(2):326-337.e12.
            2. Elkashef SM et. al. (May 2017). IDH Mutation, Competitive Inhibition of FTO, and RNA Methylation. Cancer Cell. 31(5):619-620.
            3. Song H et. al. (March 2019). METTL3 and ALKBH5 oppositely regulate m6A modification of TFEB mRNA, which dictates the fate of hypoxia/reoxygenation-treated cardiomyocytes. Autophagy. :1-19.
            4. Panneerdoss S et. al. (October 2018). Cross-talk among writers, readers, and erasers of m6A regulates cancer growth and progression. Sci Adv. 4(10):eaar8263.
            5. Zheng ZQ et. al. (July 2019). Long non-coding RNA FAM225A promotes nasopharyngeal carcinoma tumorigenesis and metastasis by acting as ceRNA to sponge miR-590-3p/miR-1275 and upregulate ITGB3. Cancer Res.
            6. Niu Y et. al. (March 2019). RNA N6-methyladenosine demethylase FTO promotes breast tumor progression through inhibiting BNIP3. Mol Cancer. 18(1):46.


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