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        主頁 &amp;gt; 技術服務 &amp;gt; STR細胞株鑒定

        細胞株鑒定服務

        細胞株鑒定技術介紹

        技術簡介:

        許多生物相關研究都使用細胞,但是細胞系污染和錯誤鑒定一直是一個普遍存在的問題,據報道,國外實驗室有20%左右的細胞株被錯誤判斷和交叉污染,ATCC和NIH等機構已經建議對實驗所用細胞進行鑒定,以保證實驗數據的準確性和可重復性,很多雜志編輯部也要求作者投稿時附上細胞株鑒定證明,很多細胞庫現在都要對提交來的細胞系進行鑒定,并對細胞系之間的交叉污染進行監測。生物藥注冊申報、課題基金申請、高質量文獻發表,細胞系鑒定的數據報告必不可少。

        STR廣泛存在于人類及哺乳動物的基因組中,具有高度多態性,它們一般由2-6個堿基構成一個核心序列,核心序列串聯重復排列,由核心序列重復數目的變化產生長度多態性。其多態性主要源自核心序列重復次數在個體間的差異,因此利用STR可以有效進行細胞鑒定。大量研究表明STR基因分型方法是進行細胞交叉污染和性質鑒定的最有效和準確的方法之一,STR基因分型應用于細胞鑒定已被ATCC等機構強烈推薦。美國的ATCC細胞庫,德國的DSMZ細胞庫以及日本的JCRB細胞庫等為STR分型提供了各種細胞株的數據供比對。

        技術優勢:


             • 課題基金申請和高質量文章發表
             • 一個細胞實驗項目開始/結束
             • 新獲得的細胞或實驗室傳5代以上的細胞
             • 細胞系實驗結果與預期有較大差別
             • 使用細胞系進行生物制藥研究
             • 準備凍存保種或已凍存保種多年的細胞

        上海天昊生物細胞鑒定位點信息

        技術優勢:


             • 高度豐富信息:針對ATCC檢測的8個特異性位點以及性別決定位點Amelogenin設計,可以準確判斷交叉污染和細胞類型;
             • 高靈敏度:可以檢測最低至0.4ng DNA,微量污染也可檢測;
             • 高通量系統化平臺:日處理量上千個檢測,數據分析比對采用自動化軟件分析系統,結果更加準確客觀。

        技術參數與實驗流程


        樣品要求


        基因組DNA:
              a) 樣品需求量:總量≥400 ng;濃度≥20ng/μl;
              b) 樣品純度:OD260/280 =1.8~2.0;
              c) 樣品無明顯降解;

        細胞樣本:
              a) 細胞數≥106 cells;
              b) 低溫運輸保存;
              c) 樣品無明顯降解;

        實驗流程


              a) 獲得需鑒定的細胞系;
              b) 樣品DNA抽提與質檢;
              c) STR位點熒光引物PCR擴增;
              d) 3730XL毛細管電泳儀電泳,得到細胞基因STR位點分型數據;
              e) 將得到的數據分析后與細胞數據庫對比
        結果提供
              a) 項目報告:包括實驗過程及涉及的分型膠電泳圖與說明,STR分型結果,基因型信息,細胞株鑒定分析分析結果等。
              b) 原始數據及客戶所需的其它資料。

        結果展示


        3730XL毛細管電泳儀電泳,得到細胞基因STR位點分型數據

        將得到的數據分析后與細胞數據庫對比

        以上細胞為例,100%匹配的共有3例

        天昊生物細胞株鑒定近期發表文章:

        1. Feedback activation of leukemia inhibitory factor receptor limits response to histone deacetylase inhibitors in breast cancer. Cancer Cell. 2016 Sep 12;30(3):459-73.(IF= 23.214 )
        2. c-Myc alteration determines the therapeutic response to FGFR inhibitors.Clinical Cancer Research. 2016 Jul 11. (IF= 8.738)
        3. JX06 selectively inhibits pyruvate dehydrogenase kinase PDK1 by a covalent cysteine modification. Cancer research. 2015 Nov 15;75(22):4923-36. (IF= 8.556)
        4. The Marine-Derived Oligosaccharide Sulfate MS80, a Novel Transforming Growth Factor b1 Inhibitor, Reverses Epithelial Mesenchymal Transition Induced by Transforming Growth Factor-b1 and Suppresses Tumor Metastasis. Journal of pharmacology and experimental therapeutics. 2016 Oct;359(1):54-61. (IF= 3.76)
        5. Triptolide Induces Cell Killing in Multidrug-Resistant Tumor Cells via CDK7/RPB1 Rather than XPB or p44. Molecular cancer therapeutics. 2016 Jul;15(7):1495-503. (IF= 5.58)
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