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        主頁 &amp;gt; 技術服務 &amp;gt; RFLP SNP分型技術(1SNP)

        RFLP SNP分型技術(1SNP)

        RFLP SNP分型技術(1SNP)

        技術簡介:

            已知的很多SNP位點正好位于限制性內切酶的識別區域,針對這些SNP位點我們就可以使用此方法進行SNP分型。本方法非常適合單個位點大量樣品的已知SNP的基因分型研究。

        技術方法:


            RFLP技術于1980年由人類遺傳學家Bostein提出。它是第一代DNA分子標記技術。Donis—Keller利用此技術于1987年構建成第一張人的遺傳圖譜。DNA分子水平上的多態性檢測技術是進行基因組研究的基礎。已被廣泛用于基因組遺傳圖譜構建、基因定位以及生物進化和分類的研究。RFLP是根據不同品種(個體)基因組的限制性內切酶的酶切位點堿基發生突變,或酶切位點之間發生了堿基的插入、缺失,導致酶切片段大小發生了變化,通過電泳將其區分。

            我們可以利用限制性內切酶的特殊屬性來對一些SNP進行分型。有些SNP多態位點正好處于限制性內切酶的識別位點處,其中一種多態對應的PCR擴增片斷能夠被相應的內切酶切動,而另一種卻不能,因此通過對酶切后的PCR產物電泳后的片斷長度分析可知檢測樣本在該位點處的基因型。如果檢測SNP位點不存在合適的酶切位點,往往可以通過在PCR引物3’端改變個別堿基引入限制性內切酶酶切位點,通過這種引物修飾法可以實現絕大多數SNP位點的分型都能用RFLP分析來實現。整個技術的示意圖(以KpnI酶切位點SNP為例)如下:

        應用領域:


            本方法涉及到很多需要對突變或者SNP多態進行分型的遺傳研究領域。

        檢測對象:

              DNA

        服務內容:

              DNA樣本的質檢與標化;
              引物的設計、內切酶的選取以及酶切體系優化;
              SNP位點分型;
              分型數據的結果判讀。

        檢測示例:

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